高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內(nèi),通過加熱,使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡,然后關(guān)閉排氣閥,繼續(xù)加熱,此時由于蒸氣不能溢出,而增加了滅菌鍋內(nèi)的壓力,從而使沸點增高,得到高于100℃的溫度。導致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。在使用高壓滅菌鍋滅菌時,滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否*極為重要,因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓,所以,當水蒸汽中含有空氣時,在同一壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。所以飽和蒸汽的滅菌更*!
一、高壓滅菌鍋使用前要水加到水位線;
二、將需滅菌的培養(yǎng)基、蒸餾水或其它器皿放入滅菌鍋內(nèi),關(guān)閉鍋蓋,檢查排氣閥、安全閥狀態(tài)(上下排氣閥打開安全閥關(guān)合然后加熱,方便空氣排出,上、下排氣閥都同時處于開啟狀態(tài)待有水蒸汽從上、下閥溢出,此狀態(tài)保持7、8分鐘后,即排出空氣后上排氣閥關(guān)合,下排氣閥調(diào)小,安全閥保持關(guān)合狀態(tài));
三、打開電源,檢查參數(shù)設(shè)置是否正確,然后按下“work”鍵,滅菌鍋開始工作;自動派冷氣,到105℃時,底部排氣閥門自動關(guān)閉,然后壓力開始上升;
四、壓力升至0.15MPa(121℃)時,滅菌鍋再次自動放氣,然后開始記時,一般培養(yǎng)基滅菌20min,蒸餾水滅菌30min;
五、達到規(guī)定的滅菌時間后,關(guān)閉電源,打開放氣閥緩慢放氣;當壓力指針降至0.00MPa時,放氣閥無蒸汽排除時,方可開啟鍋蓋。
六、高壓滅菌鍋使用注意事項
1、汽未放盡前,不得開啟高壓鍋;
2、如果滅菌后的培養(yǎng)基在鍋內(nèi)不及時拿出,需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開,切忌將培養(yǎng)基封閉在鍋內(nèi)過夜。
3、壓力表指針在0.05MPa以上時,不能過快放汽,以防止壓力急速下降,液體滾沸,從培養(yǎng)容器中溢出。
4、操作過程,請注意安全,小心燙傷。